Función de los genes estilares NaSTEP y NaTrxh en el reconocimiento y rechazo del polen, así como la ruta de secreción de NaTrxh en Nicotiana
Facultad de Química, UNAM, Portal de Datos Abiertos UNAM, Colecciones Universitarias
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720.#.#.a: Felipe Cruz García
245.1.0.a: Función de los genes estilares NaSTEP y NaTrxh en el reconocimiento y rechazo del polen, así como la ruta de secreción de NaTrxh en Nicotiana
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653.#.#.a: Biología reproductiva en plantas; Biología molecular y genética
506.1.#.a: La titularidad de los derechos patrimoniales de este recurso digital pertenece a la Universidad Nacional Autónoma de México. Su uso se rige por una licencia Creative Commons BY 4.0 Internacional, https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/legalcode.es, fecha de asignación de la licencia 2009, para un uso diferente consultar al responsable jurídico del repositorio por medio de contacto@dgru.unam.mx
041.#.7.h: spa
500.#.#.a: Mucha especies de angiospermas son muy selectivas al elegir con quién tener descendencia. Esto les permite evitar la autofecundación y sus consecuencias negativas en la diversidad genética y en la adaptación. Entre las estrategias que les permite promover la polinización curazada con éxito, se encuentra el desarrollo de estructuras florales atractivas para los polinizadores, así como mecanismos genéticos que les permiten reconocer y eliminar el polen polen genéticamente muy relacionado. El sistema de reconocimiento del polen se conoce como sistema de incompatibilidad (SI), y en varias especies está controlado por el locus multialélico S, el cual determina la especificidad del reconocimiento tanto en la parte masculina (grano de polen) como en la femenina (pistilo). En la familia Solanaceae, el SI es gametofítico. La determinante femenina codifica una ribonucleasa especifica del pistilo, denominada S-RNasa; mientras que la determinante masculina codifica una proteína con una caja F específica del polen, llamada SLF. Para que ocurra el rechazo del polen, las determinantes de la especificidad del mismo haplotipo interaccionan físicamente en el citoplasma del tubo polínico (TP). Además de las determinantes de especificidad, se requiere de los productos de otros genes tanto estilares como del polen que no están ligados al locus S. Al momento, sólo se han identificado dos genes estilares que están directamente involucrados en el rechazo del polen: HT-B y 120K. Como puede apreciarse, el pistilo juega un papel preponderante en el reconocimiento del polen, ya que este órgano femenino al parecer evolucionó para producir moléculas que brinden, por un lado, sustento alimenticio o a los tubos polínicos (TP) deseados para fecundar a los óvulos y, por otra parte, aquellos factores que le permitan seleccionar y eliminar a los TP que le presenten un inconveniente genético, por provenir de pólenes producidos por la misma planta , de sus padres o/y de sus hermanos. En nuestro grupo nos hemos dado a la tarea de indentificar factores estilares no ligados al locus S que participen en el rechazo del polen en Nicotiana. Utilizando estrategias de genética molecular, identificamos a dos genes estilares: NaTrxh y NaStEP. El gen NaTrxh se expresa preferentemente en especies incompatibles de Nicotiana y codifica una tiorredoxina h que se secreta a la matriz extracelular del tejido de transmisión de los estilos de N. alata. Además, NaTrxh reduce a las S-RNasas in vitro (Juárez-Díaz et al., 2006. JBC). El gen NaStEP codifica una glicoproteína con homología a inhibidores de proteasas tipo Kunitz. Tanto el transcrito como la proteína de NaStEP tienen una expresión y una localización específica en el estigma. NaStEP se almacena en las vacuolas de las células papilares del estigma, pero cuando los estigmas son polinizados se libera al exudado estigmático, en donde interacciona con el polen y los tubos polínicos (Busot-González et al., 2008. JXB). De esta manera, debido a las características de estos genes, consideramos que éstos tienen un potencial alto de ser parte de la vía bioquímica del rechazo del polen en Nicotiana. Es por esto que el objetivo general del proyecto es evaluar la función en el rechazo del polen de NaTrxh y NaStEP, así como establecer la ruta de secreción que sigue la tiorredoxina NaTrxh en Nicotiana. Para resolver este objetivo, esencialmente se generarán plantas transgénicas de Nicotiana donde la expresión de ambos genes se encuentre silenciada, determinando así su efecto en el reconocimiento y rechazo del polen. Además, en el caso de NaStEP buscaremos si esta proteína interacciona con proteínas del tubo polínico, utilizando básicamente a NaStEP como anzuelo en ensayos de doble híbrido en levaduras y ensayos bioquímicos de interacción proteína-proteína. Por otra parte, debido a que la secreción de NaTrxh es un evento novedoso en sistemas vegetales, por carecer de un péptido señal ortodoxo, determinaremos qué región de la NaTrxh es la responsable de su secreción al apoplasto, construyendo por mutagénesis dirigida diferentes versiones de la proteína y evaluando su ruta de secreción en plantas transgénicas de N. tabacum y en ensayos de expresión transitoria en hojas de N. benthamiana. Finalmente, se rastreará in vivo por microscopía electrónica de transmisión la ruta que sigue NaTrxh para su secreción al apoplasto. Los resultados de esta investigación tendrán un impacto sumamente relevante tanto en el área de incompatibilidad sexual, ya que de participar NaTrxh y NaStEP, se podrán ir disecando las vías bioquímicas que conducen al del rechazo del polen en sistemas basados en S-RNasas. Además, se hará una fuerte contribución en el área del tráfico de proteínas en plantas, ya que NaTrxh parece seguir para su secreción al apoplasto una vía independiente al retículo endoplásmico y el aparato de Golgi, las cuales no están descritas en plantas.
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Facultad de Química, UNAM, Portal de Datos Abiertos UNAM, Colecciones Universitarias
Dirección de Desarrollo Académico, Dirección General de Asuntos del Personal Académico (DGAPA). "Función de los genes estilares NaSTEP y NaTrxh en el reconocimiento y rechazo del polen, así como la ruta de secreción de NaTrxh en Nicotiana", Proyectos Universitarios PAPIIT (PAPIIT). En "Portal de datos abiertos UNAM" (en línea), México, Universidad Nacional Autónoma de México.