dor_id: 1501433
506.#.#.a: Público
650.#.4.x: Biología y Química
336.#.#.b: other
336.#.#.3: Registro de colección de proyectos
336.#.#.a: Registro de colección universitaria
351.#.#.b: Proyectos Universitarios PAPIIT (PAPIIT)
351.#.#.a: Colecciones Universitarias Digitales
harvesting_group: ColeccionesUniversitarias
270.1.#.p: Dirección General de Repositorios Universitarios. contacto@dgru.unam.mx
590.#.#.c: Otro
270.#.#.d: MX
270.1.#.d: México
590.#.#.b: Concentrador
883.#.#.u: https://datosabiertos.unam.mx/
883.#.#.a: Portal de Datos Abiertos UNAM, Colecciones Universitarias
590.#.#.a: Administración central
883.#.#.1: http://www.ccud.unam.mx/
883.#.#.q: Dirección General de Repositorios Universitarios
850.#.#.a: Universidad Nacional Autónoma de México
856.4.0.u: http://datosabiertos.unam.mx/DGAPA:PAPIIT:IN221011
100.1.#.a: José Alejandro Sandoval Romero
524.#.#.a: Dirección de Desarrollo Académico, Dirección General de Asuntos del Personal Académico (DGAPA). "Regulación del reciclamiento de los canales de Ca2+ de bajo umbral de activación por la GTPasa pequeña Rab11 y su relevancia en la secreción hormonal", Proyectos Universitarios PAPIIT (PAPIIT). En "Portal de datos abiertos UNAM" (en línea), México, Universidad Nacional Autónoma de México.
720.#.#.a: José Alejandro Sandoval Romero
245.1.0.a: Regulación del reciclamiento de los canales de Ca2+ de bajo umbral de activación por la GTPasa pequeña Rab11 y su relevancia en la secreción hormonal
502.#.#.c: Universidad Nacional Autónoma de México
561.1.#.a: Facultad de Estudios Superiores Iztacala, UNAM
264.#.0.c: 2011
264.#.1.c: 2011
307.#.#.a: 2019-05-23 18:40:21.491
653.#.#.a: Fisiología de los canales de calcio dependientes de voltaje; Fisiología
506.1.#.a: La titularidad de los derechos patrimoniales de este recurso digital pertenece a la Universidad Nacional Autónoma de México. Su uso se rige por una licencia Creative Commons BY 4.0 Internacional, https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/legalcode.es, fecha de asignación de la licencia 2011, para un uso diferente consultar al responsable jurídico del repositorio por medio de contacto@dgru.unam.mx
041.#.7.h: spa
500.#.#.a: La síntesis y secreción de prolactina son procesos que dependen de la actividad de los canales de Ca2+ dependientes de voltaje (CaVs) de los lactotropos. En estas células los cambios del potencial de membrana ocasionan la apertura de los canales CaV y con ello un incremento brusco de la concentración de Ca2+ intracelular lo que provoca la activación de vías de señalización que conducen a la movilización de las vesículas de secreción, su aproximación y fusión a la membrana celular, para finalmente vaciar su contenido en el espacio extracelular. La regulación de la secreción de prolactina se ha estudiado en una línea celular derivada de un adenoma hipofisiario de la rata denominada GH3 en la que se han reconocido diferentes factores que promueven o inhiben su liberación por medio de modificar la actividad de los canales CaV. Entre estos, se ha visto que la insulina favorece la secreción de prolactina por medio de incrementar la expresión funcional de los canales CaV de bajo umbral de activación (LVA o tipo T). Existen evidencias de que este efecto pudiera ser postraduccional, sin embargo, hasta el momento se desconocen los mecanismos moleculares que determinan el incremento de la corriente de tipo T causado por la insulina. _x000D_
Considerando que el reciclaje de los canales iónicos en general y de canales de Ca2+en particular es un mecanismo para regular su número en la membrana celular, estudios recientes han propuesto que el aumento en el reciclamiento de los canales endocitados en vesículas pudiera mediar algunos de los procesos que incrementan la expresión funcional de dichos canales. Precisamente, el propósito central de este trabajo es investigar la participación del reciclamiento de canales de Ca2+ de tipo T en las células GH3 durante la secreción de prolactina estimulada por insulina. En este sentido se ha mostrado que las GTPasas pequeñas de la familia Rab son elementos cruciales de la maquinaria que controla el reciclamiento de proteínas hacia la membrana celular, y entre ellas se ha destacado el papel de Rab11 en la reincorporación de los canales de Ca2+ cardiacos y neuronales. _x000D_
En la primera fase de este trabajo se caracterizará el efecto de la insulina sobre la secreción de prolactina en las células GH3, y se confirmará la expresión de canales T (CaV3.1), Rab 11 y del receptor a insulina en esta línea celular. Simultáneamente se obtendrá una construcción de los canales T recombinantes CaV3.1 con un epítope de hemaglutinina (CaV3.1-HA), por medio de la cual se dará seguimiento a este tipo de canales durante su expresión heteróloga. En la segunda fase de la presente investigación, se expresarán dos mutaciones de Rab11 en células HEK-293 junto con canales CaV3.1-HA, para definir si el incremento de la corriente T inducido por la insulina depende de un aumento en el número de canales reciclados a la membrana celular. _x000D_
La hipótesis de la presente propuesta predice que el uso de una dominante positiva de Rab11, la mutante Q70L podría favorecer la reinserción de canales a la membrana celular. En contraste, la expresión de la mutante dominante negativa S25N podría prevenir el incremento de la corriente T en células tratadas con insulina. Los efectos de las mutantes de Rab11 se definirán por medio de las técnicas de citometría de flujo y patch-clamp. En la fase final de la investigación, para confirmar la relevancia de Rab11 en la secreción hormonal en las células GH3 se usarán ARNs pequeños de interferencia (siRNAs) para el silenciamiento del gen que codifica la proteína y de esta manera reducir el reciclamiento de los canales nativos. El silenciamiento de Rab11 se confirmará por Western-blot y sus efectos sobre el reciclamiento de canales de tipo T se analizarán por medio de la técnica de patch-clamp._x000D_
Hasta el momento pocos estudios se han enfocado a investigar la relevancia del reciclamiento de canales iónicos, incluso se ha llegado a dudar que los canales CaV puedan ser reinsertados en la membrana celular después de ser removidos. Considerando lo anterior, identificar al reciclamiento de los canales T como un mecanismo involucrado en la regulación de procesos fisiológicos tan relevantes como la secreción hormonal podría abrir nuevos horizontes en estudios de fisiología y endocrinología molecular._x000D_
046.#.#.j: 2019-11-14 12:26:40.706
264.#.1.b: Dirección General de Asuntos del Personal Académico
handle: 00cc1a18a0e8bedd
harvesting_date: 2019-11-14 12:26:40.706
856.#.0.q: text/html
last_modified: 2019-11-22 00:00:00
license_url: https://creativecommons.org/licenses/by/4.0/legalcode.es
license_type: by
No entro en nada
No entro en nada 2